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2017年8月29日火曜日

TransGen Biotech社 人気商品 HOT ITEMS

TransBionovo Co., Inc.の分子生物学関連の研究試薬ラインナップの中で特に売れ筋の商品をご紹介致します。


キャンペーンの無料試供品(一部製品)は以下のバナーからお申し込み。






人気製品(採用実績はこちらのページでご確認頂けます)


  1. EasyPure® HiPure Plasmid MiniPrep Kit new!

    カタログ番号: EM111

  2. 概要:

    このEasyPure® HiPure Plasmid MiniPrep Kitにより、20 ml以下(LB)または4 ml以下(ArtMedia® Plasmid Culture)の細菌培養物から高収量(最高40μg)で高品質なプラスミドDNAを効率的に分離を行えます。エンドトキシンは、新しい緩衝液を用いたカラムでの単純なインキュベーションによって除去されます。精製されたプラスミドDNAは、制限酵素消化、ライゲーション、形質転換、DNAシーケンシング、およびトランスフェクションを含む様々な分子生物学用途に適しております。

    特長:

    • 高速:20分で全手順を実行できます。

    • 単純:エンドトキシンはカラムで除去されます。

    • 高収率:DNA収量は最大40μgです。


    内容物:

    EM111 Kit Contents

    保存:

    Proteinase K solution at -20°C for one year; others at room temperature (15-25°C) for one year

    手順:

    EM111 Procedures


  3. EasyTaq® DNA Polymerase

    カタログ番号: AP111

  4. 概要:

    当製品EasyTaq®DNA polymeraseは、Thermus aquaticus由来のクローン化DNAポリメラーゼを発現する大腸菌から精製されております。この酵素は、約94kDaの分子量を有する単一のポリペプチドからなります。5'-3 'DNAポリメラーゼ活性と5'-3'エキソヌクレアーゼ活性を持ちます。当製品は通常の増幅に適しています。PCR産物はPAGEには適しておりません。

    特長:

    • 伸長速度は約1〜2 kb /分

    • テンプレートに依存しないAが、PCR産物の3 '末端に生成される。PCR産物は、pEASY®-T vectorsに直接クローニングすることが可能。

    • 4kbまでのゲノムDNA断片の増幅


    用途:

    • Routine PCR

    • Colony PCR


    ユニットの定義:

    当製品の1ユニットは、10 nmolのデオキシリボヌクレオチドを74℃・30分間で酸不溶性沈殿物に取り込みます。

    品質管理:

    当製品は、以下の品質管理アッセイに合格しています。
    Functional absence of double- and single-strand endonuclease activity; >99% homogeneous measured by SDS-PAGE. Each batch of EasyTaq® DNA Polymerase has been assayed for amplification efficiency to amplify p53 gene from 10 ng of human genomic DNA.

    保存バッファー:

    20mM Tris-HCl (pH8.0)、0.1mM EDTA、1mM DTT、100mM KCl、50%グリセロール、安定化剤

    10×EasyTaq® Buffer (with Mg2+):

    200 mM Tris-HCl (pH 8.3)、200 mM KCl, 100 mM (NH4)2SO4、20 mM MgSO4、その他

    内容物:

    AP111 Component

    保存:

    at -20°C for two years

    手順:

    AP111 Thermal cycling conditions



  5. pEASY®-T5 Zero Cloning Kit

    カタログ番号: CT501

  6. 概要:

    pEASY®-T5 Zero Cloning Vectorには自殺遺伝子が含まれています。PCR断片のライゲーションが遺伝子の発現を阻害します。非組換えベクターを含む細胞は、プレーティングの際に死滅します。したがって、青白判定は必要とされません。

    特長:

    • Taq増幅PCR産物の5分間の高速ライゲーション。

    • 高いクローニング効率。最高100%の陽性クローン。

    • 青白選択は必要ありません。

    • 短く大きなフラグメントのクローニングに適しています。

    • カナマイシンおよびアンピシリン耐性遺伝子。

    • シーケンシングのためのM13フォワードプライマーおよびM13リバースプライマー。

    • インビトロ転写のためのT3プロモーターおよびT7プロモーター。

    • Trans1-T1ファージ耐性化学的コンピテントセル、高形質転換効率(> 109 cfu /μgpUC19 DNA)および急速増殖


    内容物:

    ComponentsCT501-01CT501-02
    (20 rxns)(60 rxns)
    pEASY ®- T5 Zero Cloning Vector (10 ng/μl)20 µl3×20 µl
    Control Template (5 ng/μl)5 µl5 µl
    Control Primers (10 μM)5 µl5 µl
    M13 Forward Primer (10 μM)50 µl150 µl
    M13 Reverse Primer (10 μM)50 µl150 µl
    Trans 1-T1 Phage Resistant Chemically Competent Cell10×100 μl30×100 μl

    関連図:

    CT501



新製品

新製品
  • TransIntro™ EL Transfection Reagent

    カタログ番号: FT201

  • 概要:

    TransIntroTM EL Transfection Reagentは、高効率で毒性の低い多種多様な真核生物細胞株にDNAとRNAをトランスフェクトするように設計された非リポソーム製剤です。 一次細胞および他のトランスフェクションが困難な細胞も効果的にトランスフェクトされることが可能です。

    特長:

    • 高効率

    • 低い細胞傷害性

    • DNAおよびRNAをトランスフェクト

    • 血清および抗生物質の存在下で使用することができる


    保存:

    at 2-8°C for one year

    関連図:

    FT201




参考価格


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ご注文方法


ご希望の製品をメールでお知らせ頂きますとすぐにお見積りをご提示致します。


商品リスト


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関連サービス



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電話: 052-262-6732
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2017年7月19日水曜日

タンパクのシークエンシング 受託サービス

Bio-Synthesis Inc.によるペプチドの受託シーケンシングでございます。

ペプチドのシーケンシング

バイオロジカが提供するタンパク質シークエンシングサービスにより正確で信頼性の高いタンパク質の特性評価と同定を。

酵素消化によるペプチド(の合成サービスはこちら)の質量分析はタンパク質同定の一般的な方法ですが、自動の気相シーケンシング(GPS)としても知られているエドマンシーケンシング(N末端シークエンシング)は質量分析法では利用できない補完的データを提供します。このGPSにより、未知のタンパク質を同定するため、ならびに組換えタンパク質の品質をチェックし、酵素切断部位を決定することができます。創薬の全段階で使用される強力な補完的技術です。

概要


エドマン法による、タンパク質の特性評価および同定のための2つのサービスを提供致します:
  • N末端配列分析
  • 内部タンパク質配列解析
私たちのサービスは、
  • 低ピコモルレベルでの高感度シークエンシング
  • N末端から最初の7〜20アミノ酸残基
  • 溶液、ゲル、またはPVDFメンブレン中の精製されたタンパク質またはペプチドの配列
  • 明確で分かりやすいレポート
  • 研究、GLPおよびGMPの使用に
  • 5-10日後に結果報告(サンプル移動日数は除く)

各サービスと参考価格


ServicesCost/Sample
First 5 amino acids*こちらをご参照ください。
Additional amino acid beyond first 5 cycles
15 amino acid sequencing*
Desalting using either an ABI ProSorbTM cartridge or a Millipore ZipTipTM
Internal Sequencing
*タンパク質によっては、アセチル化、ピログルタミン酸などの遮断基によってN末端修飾されており、エドマン分解によるシーケンシングが妨げられる場合があります。初期設定用の料金が別途適用されます。

同社プロテオミクス施設の主な重要機器
  • Applied Biosystems 494 Procies High-Throughput Protein Sequencer
  • Applied Biosystems 494 cLC High Sensitivity Protein Sequencer
  • Hitachi L-8800 physiological fluids amino acid analyzer
  • Applied Biosystems' 3100 genetic analyzers
  • Dionex DX-500 for monosaccharide analysis
  • Applied Biosystems Voyager Mass Spectrometry
  • Water 717 and 2475 multi wavelength fluorescence UV Detection system
  • Shimadsu HPLC system

品質管理


機器メーカー推奨の適切な基準で品質管理を行います。すべての分析は、最新の分析ソフトウェアパッケージを使用します。
同社のN末端タンパク質シークエンシングは、Applied Biosystems社のタンパク質シーケンサー上で実行され、オンラインHPLCシステムを備えた自動化されたエドマン化学を使用します。タンパク質/ペプチドをサンプルのN末端からその構成アミノ酸に連続的に分解します。産生されたアミノ酸は誘導体化され、RP-HPLCによって分離され、エドマン化学の各サイクルについてUV検出によって視覚化されます。標準的な混合物と比較することにより、アミノ酸を定量します。C末端シークエンシングが必要な場合、MS / MSによる質量マッピングを行います。
まずエドマン配列決定を行い、タンパク質のN末端の最初の7アミノ酸の報告となりますが、一部のタンパク質は正確に処理できないシグナル配列を含んでおります。また、分解プロセスの一部として切断される場合もあります。アセチル化、ピログルタミン酸およびN末端配列決定の成功を妨げる他の遮断基によってN末端修飾されている場合もあります。なお、現在、C末端のための確立された化学的配列決定法はありません。

サンプル調製ガイドライン


最適なタンパク質配列決定のためには、適切なサンプル調製が不可欠です。 1つの重要なパラメータは、他のタンパク質のサンプル汚染ですが、「標的」の配列が他の配列の存在によって不明瞭になる可能性があるため、有用なデータを生成することがより困難になるからです。その他の考慮すべき点として、濃度、試料の量、および界面活性剤、グリセロール、緩衝液および他の塩の存在および濃度などがあり、配列決定の結果に影響を及ぼし得ます。

サンプル量

  • Peptide/Protein
  1. N末端シーケンシングの場合:5〜50ピコモル。
  2. 内部シーケンシングの場合:5〜100pmol。
  • ゲルサンプル: >50 picomoles should be supplied for gel samples or if clean-up is required or desired protein band can be visually identified.
注:内部シーケンシング用の各サンプルには、適切なブランク(ネガティブコントロール)が必要です。

Sample conditions・Format


サンプル送付

液体の場合チューブでキャップをよく締めてお送りください。PVDFメンブレン上のサンプルは、清浄な濾紙2枚の間に乾燥したメンブレンを送ることをお勧めします。また、シーケンシングするバンドを示す膜のプリント(またはスケッチ)も含めてください。
  1. サンプル送付前に、 Protein Sequencing Submission Form を作成し、コピーをサンプルに添付してください。
  2. お問い合わせ・見積もりは: sales [at] biologica.co.jp まで。


関連製品




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2017年4月20日木曜日

De Novo Antibody Sequencing Services

抗体のシーケンシング

ご注文・お問い合わせはこちら

Creative Biolabsによるde novo抗体シークエンシングのサービスを提供致します。同社独自の技術であるDatabase Assisted Shotgun Sequencing (DASS)により実現しました。

あらゆる種、アイソタイプ、アロタイプの抗体の重鎖・軽鎖全体、可変部にわたるシーケンシングが可能です。

多価の精製モノクローナル抗体は、所望の領域の100%の配列決定することができます。同社が成功した数多くの事例から、抗体のシーケンスを100%の精度で提供。

DASS systemにより、
  • Confirmation & validation of produced mAb
  • QC analysis
  • IND (Investigational New Drug)・NDA (New Drug Application)


計測機器


高磁場Orbitrap EliteハイブリッドMS(Thermo Scientific)[240,000の分解能と1ppm未満の分析精度]を使用。
フラグメンテーション手法は、CID ( Collision Induced Dissociation)、HCD (Higher energy collision dissociation)、およびETD (Electron Transfer Dissociation)。
これらの技術を組み合わせて使用することで、最高のカバレッジを確保できます。


Sequence Validation Guarantee


お急ぎの皆様のために、確実・迅速に配列検証を行います。
  1. 還元された軽鎖および重鎖の質量が測定されます。軽鎖の配列は、±1.2Daの範囲内で一致し、重鎖については、±1.8Daが許容されます。決定された配列がタンパク質質量と一致しない場合、請求はされません(この偏差はプロトン2つよりも小さいことに注意してください)。
  2. 抗体の各突然変異は、少なくとも2つの有意なスペクトルによって確認されます。これにより、シーケンスで同重の置換が含まれないことが保証されます。ペプチドマップだけに依存しないでください。[同重の置換とは、GG = N、YM = FM(Ox)のように同じ質量の交換のことです。他社が使用しているペプチドマップは、この種のエラーに敏感でないことがよくあります。]


Sequencing of the V and J and C Segments by DASS


抗体のVおよびJおよびC遺伝子セグメントは、公開データベースで入手可能ですが、抗体の成熟の間、B細胞は、親和性を最適化するために、超変異を配列に導入します。同社のマッピングアルゴリズムはエラー耐性があり、"変異した"ペプチドを、対応する生殖系列に確実にマッチさせることができます。

ペプチドの数が多いため、抗体中のすべてのペプチド結合の配列情報が得られます。典型的には、各アミノ酸(AA)位置に対して20〜70の異なるMS / MSスペクトルが生成されるため、プロリンおよびアルギニンリッチなペプチドの最も難しい配列さえも解明することができます。すべてのアミノ酸の順序が明確であるため、エドマン法のような時間のかかる技術は必要ありません。


CDR3領域のDe Novo シークエンシング


軽鎖のCDR3はほとんどが生殖系列の配列によってコードされておりますが、重鎖のCDR3は通常データベースには存在しません。いわゆるDセグメントによってコードされるが、これらはヌクレアーゼおよび末端トランスフェラーゼによって修飾されます。典型的には、Dセグメントのわずか1〜4アミノ酸が成熟抗体に残り、Dセグメントの残りの部分は「人工的」であり、新たにシーケンスされなければなりません。

同社の方法は、断片化プロセス中に多数の重複ペプチドを生成し、非常に長い未知のアミノ酸配列の読み取りを可能にします。インテリジェントなデータマイニングと組み合わせた高品質のMS / MSスペクトルは、本のようにCDR3を読むことができます。この技術は非常に強力で、20 kDaのタンパク質を配列決定することができました。このタンパク質は、データベースに相同体がありませんでした。


Isobaric Amino Acids


他のMSを基にした方法とは対照的に、同社はほとんどの同重体アミノ酸の組み合わせを識別することが可能です。例えば:
  • W(Trp)は質量精度でGE(Gly-Glu)、AD(Ala-Asp)、SV(Ser-Val)と区別できます。
  • R(Arg)は質量精度でGV(Gly-Val)と区別できます。
  • Q(Gln)は質量精度でK(Lys)と区別できます。
  • N(Asn)はGG(Gly-Gly)と区別できます。同社のDASS技術は、GG間の結合破壊を保証し、アスパラギンに独自の誘導体化技術を使用してGGでないことを確認しています。
  • Q(Gln)はGA(Gly-Ala)と区別できます。同じく、GA間の結合破壊を保証し、GGでないことを保証するために、当社独自の誘導体化技術をグルタミンに使用しています。
  • キモトリプシンの生殖系列配列および切断頻度からロイシンが予測されます。


Sequencing of Fluorochrome mAbs, IgMs, and other Non-Standard Antibodies


  • 少量のサンプル(例:20μg)から約90%の確率で配列を得ることができます。
  • 配列決定のために非常に希釈したサンプル(例:ウェスタンブロット抗体)も濃縮できます。
  • 通常、抗体に結合したリガンド(FITC、Biotin、Alexa)の影響を受けません。より大きいタンパク質リガンド(PE、APC)は、配列決定をやや困難にしますが、シークエンシングの質はサンプル量に依存するため、これはより高いタンパク質濃度にすることによって補うことができます。
  • 通常、IgMはIgGのように配列決定することができます。やや多めのサンプルが必要な場合があります。定常領域はPNGase Fで切断できないいくつかのグリカンによって修飾されているため、抗体の可変部分のみの保証となります。
  • すべての種(マウス、ラット、ハムスター、ラマ、ウサギなど; Fab、scFvなど)のすべての抗体フォーマットで機能します。
  • いくつかのmAbはマトリックスにカップリングされます。これはシーケンシング法と互換性がありますが、より多くのサンプルが必要になることがあります。
  • 多くの古いハイブリドーマは、2つの軽鎖を産生します(1つは骨髄腫MOPC 21のκ鎖)。これらの混合物は、MOPC 21κ鎖が2倍モルの過剰であっても、通常は配列決定することができます。


Sample sequencing results
Sample Sequencing Results.



Other Features

  • Fast: シーケンス作業は10営業日以内に完了。
  • Sensitive: 50-100μgのタンパク質から完全なカバレッジ。
  • Robust: VJおよびVDJ領域の100%カバレッジ。
  • High-Throughput: 同社のDASS方式は、ハイスループット。
  • Professional: 経験豊富なPh.D.の科学者。高度な品質でデータを配信するためのプロトコル。 
  • Integrity: 抗体設計、クローニング、デノボシークエンシングと分析、お客様のニーズを満たすためのインビトロ最適化などのカスタムサービス。


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