ラベル IgG の投稿を表示しています。 すべての投稿を表示
ラベル IgG の投稿を表示しています。 すべての投稿を表示

2019年5月14日火曜日

抗体の受託作製サービスいろいろ

抗体の作製を委託したいとお考えの方へ

抗体作製の各種受託サービスのご案内


「どこか安く請け負ってくれるところは?」

「免疫するだけじゃなくて、精製もして欲しい」

「モノクローナル抗体は、やはり高いかな」


など、お悩みの場合は是非一度、バイオロジカがお届けする抗体作製サービスの詳細について、こちらのリンクからホームページをご覧ください。
投稿者 時刻:
ラベル: , , , , ,
場所: 日本、〒460-0011 愛知県名古屋市中区大須４丁目１０−４０

2018年6月19日火曜日

キャンペーン | ポリクローナル抗体作製受託サービス

IgGポリクローナル抗体作製サービスのご紹介です。
(IgYはこちらへ)


http://www.biologica.co.jp/products-service/custom-antibody/polyclonal-igg/
ウサギなどの動物に合成ペプチド(詳細はこちら)などの抗原（免疫原）を注射し、抗体を産生させます。繰り返し免疫作業を行い、数か月後に血液（血漿、血清）を採取し、抗体を得ます(精製します)。


お問い合わせはこちらからどうぞ!!

[概要]


合成ペプチドやタンパクを抗原とし、ウサギなどを免疫動物としてのポリクローナル抗体作製の受託サービスです。目的に合ったサービスよりご選択下さい。精製方法や免疫動物もお選び頂けます。

  1. 原則ウサギ2羽ですが、1羽もご選択可能です!!
    2. *免疫動物をウサギ以外でお考えの場合はご相談ください。
  2. ELISAも付いての料金です!!
  3. ご注文を前提に抗原部位選択も無料で承ります。


[詳細]

*免疫動物でウサギ以外をご希望の場合はご相談ください(ニワトリIgYはこちら)。
*料金についてはこちらをご覧ください。

  • パッケージ内容(ウサギ二羽の場合)

    • コード番号サービスと納品物
    コード：P-1
    抗原を支給して頂く抗体作製
    *支給頂く蛋白質量: 5mg以上    		サービス
    1. 2羽免疫
    2. ELISA
    納品
    1. IgG硫安分画成分凍結乾燥品(血清60ml相当)
    2. 分析証明書(報告書)
    コード：P-2-1
    同上の精製抗体
    *支給頂く蛋白質量: 5mg以上     		サービス
    1. 2羽免疫
    2. ELISA
    納品
    1. ProteinA精製抗体
      2. (血清30ml分、2-5mgの凍結乾燥品)
    2. 分析証明書(報告書)
    コード：P-2-2
    同上の精製抗体
    *支給頂く蛋白質量: 10mg以上    		サービス
    1. 2羽免疫
    2. ELISA
    納品
    1. 抗原アフィニティーカラム精製抗体
      2. (血清30ml分、2-5mgの凍結乾燥品)
    2. 分析証明書(報告書)
    コード：P-3
    ペプチドと抗体の基本パッケージ    		 サービス
    1. ペプチドデザインと合成(12-22残基、85%)
    2. KLHコンジュゲーション
    3. 2羽免疫
    4. ELISA
    納品
    1. 硫安分画IgG成分凍結乾燥品(血清60ml相当)
    2. 合成ペプチド2-3㎎
    3. 分析証明書(報告書)
    コード：P-4
    同上の精製抗体    		サービス
    1. ペプチドデザインと合成(12-22残基、85%)
    2. KLHコンジュゲーション
    3. 2羽免疫
    4. ELISA
    納品
    1. 抗原アフィニティ―カラム精製抗体
      2. (血清30ml分,2-5㎎の凍結乾燥品)
    2. 合成ペプチド2-3㎎
    3. 分析証明書(報告書)
    コード：P-9
    リン酸化ペプチド抗体    		サービス
    1. ペプチドデザインと合成(リン酸化と非リン酸化)
    2. KLHコンジュゲーション
    3. 2羽免疫
    4. ELISA
    納品
    1. 凍結乾燥精製抗体二種
      2. (血清30ml分アフィニテイ―精製)
    2. リン酸化、非リン酸化ペプチド2-3㎎二種
    *支給抗原の場合、抗原送付(輸出)料金が別途加算されます。
    *プラスミド、cDNAからの抗体作製はお問い合わせください。


    お問い合わせはこちらからどうぞ!!

  • ご注文の流れ

    • [タンパク配列のご提示]
    ↓
    [抗原候補を何案か提示]
    ↓
    [ご選択]
    ↓

    抗体作製の流れ概略
    *当サービス供給メーカーであるGL Biochem社の場合、全採血が標準です。


  • 抗原


    • Antigen peptide design
    • Peptide synthesis
    • Protein expression and purification
    • Antigen conjugation (to KLH, BSA or OVA)

  • 免疫動物


    • Rabbit, mouse, rat, chicken, guinea pig, goat etc.

  • Polyclonal antibody service


    • Application guaranteed antibody (ELISA, WB, IHC etc.)
    • Modification-specific antibody (Phospho-, acetyl-, methyl- antibody, etc.)

  • 精製


    • Protein A/G/L purification
    • Antigen affinity purification

  • 同定


    • ELISA
    • Dot blot
    • Western blot
    • IHC

  • ラベリング


    • HRP
    • Biotin
    • FITC

  • 特長


    • ご注文を前提の相談無料
      お客様のタンパク質の分析、抗原ペプチドの設計
    • 正確な抗原予測
      ゲノミクス、プロテオミクス、構造ゲノミクスを組み合わせ、抗原設計のために開発した効果的な方法
    • 豊富な経験
      5,000を超える抗体の生産実績。動物施設の技術者は、米国の専門家によるトレーニングを受けております。
    • カスタマーサポート
      プロジェクトの進捗状況を随時更新し、定期的にご連絡。


[メーカー]


http://www.glbiochem.com/en/index/index.aspx
GL Biochem社は、カタログペプチド、カスタムペプチド、および抗体の業界で国際的に認知され、多くの実績を有するメーカーです。


[論文*メーカーサイト]


http://www.glbiochem.com/en/tech/article.aspx



関連サービス




お問い合わせ・ご注文

メール: biologica [at] biologica.co.jp
電話: 052-262-6732
ホームページはこちらから↓
https://www.biologica.co.jp/
biologica_twitter https://www.facebook.com/BiologicaCo/ http://blogs.yahoo.co.jp/analytical_biologica
投稿者 時刻:
ラベル: , , , , , , , ,
場所: 日本、〒460-0011 愛知県名古屋市中区大須４丁目１０−４０

2017年7月21日金曜日

モノクローナル抗体 作製 受託サービス [ハイブリドーマ]

GL Biochem (Shanghai) Ltd.によるモノクローナル抗体作製の受託サービス[ハイブリドーマ方式]をご案内致します。

ファージディスプレイ方式はこちら。

http://www.biologica.co.jp/GLBiochem.htm


サービスパッケージの一例


種類仕様納品納期価格
Monoclonal package 1
(From protein to ascites purification)
  • SDS-PAGEによる蛋白質チェック
  • 免疫化と血清採取
  • ELISA同定
  • 融合とhybridoma development
  • アイソタイプ決定
  • 腹水の産生と精製 (2 clones)
  • 2 clones (Petaka)
  • 2-5mgの精製抗体
  • ELISA結果
  • アイソタイプ決定結果
  • プロジェクト報告書
21-25週こちらをご参照ください。


モノクローナル抗体作製 -基本的な流れ-

Step 1: 抗原の準備

  1. タンパク支給の場合: 免疫用で少なくとも5 mg、ELISA用で少なくとも1 mg
    *出来る限り多めに頂けますと成功率UP。
  2. ペプチド合成の場合: メーカーで合成 (3-4週) *ご支給も可

Step2: 免疫 (8-10週)

マウス: BALB/C mice, 6-week-oldを6匹

概算日数とイベント:

日数Process
Day050ul pre-immune sera and 1st-immunization with CFA (Complete Freund's adjuvant)
Day212nd-immunization with IFA (Incomplete Freund's adjuvant)
Day353rd-immunizaiton with IFA
Day45serum collected for ELISA test
We will provide ELISA data and ELISA protocol to you by e-mail
Maybe more times of immunization are needed for high serum titer. There are 2 weeks' interval between two adjacent immunization.

Step3: ハイブリドーマの作製とスクリーニング (2-3週)


Process
Day 50Strengthen-immunization for 2 mice with PBS
Day 54collection of positive serum and perform two hybridoma fusions based on highest antigen binding titer
Day 64-68ELISA test for cell culture supernatant and select positive clones;
Identify positive antibodies' subtypes
Day 69-83Provide ELISA data to you for check and we will provide 200ul culture supernatants for each positive hybridoma's. We will keep 10-20 clones of ELISA positive and keep all the positive clones at most of 2 week for message delivery.
Day 84Make sure the hybridomas the client selected.

Some positive clones will be lost in the process of subcloning and expanding. So we should start 10-15 clones at the beginning for guaranteeing 5-10 clones.

Step4: サブクローニング (4-5週) - 5-10 clones

Day611st-subcloning
Day71ELISA test for cell supernant and select positive
Day722nd-subcloning
Day82ELISA test for cell supernant and select positive
Day833rd-subcloning
Day83-day84ELISA test for cell supernant and select positive
Day84-90Choose 1 subclone with the highest ELISA titer for each positive hybridoma

Step5: ハイブリドーマの増殖とモノクローナル抗体の産生 (5-10 clones)(4-5週)

Day 91Injecting 2 mice with liquid paraffin for each clone
Day 91-98Cells expanding culture
Day99ELISA test for cell supernant; Identify all the clones still postive
Day92Injecting the hybridoma to mice intraperitoneally
Day100-106Collect ascites
Day107-114Antibody purification by protein A/G and ELISA test

Step6: 同定

ELISA>1:80000(Affinity purified antibody)

5-8 months are needed for all the process in total.




参考価格等はこちら。


関連製品




[お問い合わせ]
メール: biologica [at] biologica.co.jp
電話: 052-262-6732
ホームページはこちらから↓
http://www.biologica.co.jp/
biologica_twitter https://www.facebook.com/BiologicaCo/ http://blogs.yahoo.co.jp/analytical_biologica
投稿者 時刻:
ラベル: , , , , , , , ,
場所: 日本、〒460-0011 愛知県名古屋市中区大須４丁目１０−４０

2017年7月14日金曜日

[ファージディスプレイ] 抗体作製サービス - Recombinant IgG (組換えIgG)

ファージディスプレイ方式による抗体作製サービス(Creative Biolabs)のご紹介を致します。
同社はさまざまな種類の発現システムにおいて高効率の抗体産生サービスを提供しております。

さまざまな用途・分野での抗体製造をサポートするため、抗体産生の包括的なサービスを提供することができます。配列最適化から、遺伝子合成 (安価な遺伝子合成はこちら) から抗体の発現および精製まで、研究スケールでも工業的製造でも対応可能です。同社の抗体生産サービスには、二重特異性抗体、組換えIgG、scFv (single-chain fragment variable) / Fab (fragment antigen-binding) およびシングル・ドメイン抗体（sdAb）の産生および精製も含まれます。


発現サービス概要

  • 細菌における抗体の発現【大腸菌のペリプラズムにおける発現の分泌、大腸菌の細胞質における可溶性発現、および封入体としての不溶性発現】
  • 哺乳類細胞における抗体の発現【CHO(Chinese Hamster Ovary)または293細胞を用いた一過性発現、安定したCHO細胞での持続的な発現、高発現体を選択するための細胞株（4.5g / Lの細胞株が得られている）における持続的な発現】
  • 昆虫細胞における抗体の発現
  • 酵母における抗体の発現
  • カスタマイズされた精製プロセス

サービスの利点

  • 高い発現レベル
  • 短い作製時間
  • 高純度
  • 低毒性
  • 広範なクローニングの経験
  • 10gレベルまでの大規模
  • GLP、cGMP標準
  • ヒト化や親和性の成熟など、さらなる抗体工学

http://www.creative-biolabs.com/Antibody-Production-Services.html

Recombinant IgG Production


Creative Biolabs社は、ファージディスプレイ抗体ライブラリースクリーニングまたはマウス/ラットハイブリドーマ細胞株由来の、遺伝子操作された小さなscFvまたはFabヒト/マウス抗体を、例えば、ADCC(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity抗体依存性細胞傷害)・非ADCCといった、様々な機能のFcフラグメントを有するフルサイズ組換えヒト(またはマウス)IgGに変換するサービスを提供します。哺乳類細胞における組換えIgGの大規模な生産基盤も確立しております。


注目すべきは、ヒトにおける組換えヒトIgG抗体（ヒトタンパク質を標的とした）の挙動を模倣するために、ファージディスプレイマウスscFv / Fabライブラリー（マウスタンパク質を標的とする）に由来する特異性がマッチした組換えマウスIgG抗体がしばしば産生され、動物モデルで使用されます。


ヒト化/組換えヒトIgGの安定した発現のために、改変FRT / Flp-Inリコンビナーゼ系を用いてCHO細胞にヒトIgGを産生します。組換えマウスIgGの安定した発現には同じアプローチが用いられます。転写活性のあるゲノム座に単一の安定して組み込まれたFRT部位を含むCHO細胞株をあらかじめ選択し、それらが組換えヒトIgG（種々の抗原を標的とする）の高レベル発現体を産生することができることを証明しました。ただし、これらの予め選択された細胞株から開始しても、組換えヒト（マウス）IgGを、例えば800mg / Lといった、費用対効果の高いレベルで発現することができる安定な細胞株を作製するためにはかなりの時間と労力が必要ではあります。産生の最後に、組換え抗体は3ステップ精製されます（プロテインA / G、続いて2つの精製ステップとして、抗体モノマー>99％、エンドトキシンレベル<0.5EU / mg抗体、プロテインA残留物<10PPM）。ヒト用の抗体に相当）。また、プロセス技術は開示されません。安定細胞株の提供もされません。ですが、将来の生産に備え、細胞株は無料で2年間保管されます。

http://www.creative-biolabs.com/recombinant-igG-production.html



  • キメラ抗体発現ベクターの構築

    • ファージディスプレイ技術から得られた、またはマウス/ラットハイブリドーマ細胞株から増幅されたscFvまたはFab抗体の遺伝子は、ヒトまたはマウスのIgG軽鎖および重鎖の定常領域を含む同社独自の哺乳類発現ベクターにクローニングされます。


  • CHO細胞の一過性トランスフェクション

    • 組換え抗体の発現を確認するために、CHOまたは293細胞を用いた一過性発現を行います。小規模の抗体産生には、一過性発現は安定発現と比較してより安価です。


  • 安定したCHO細胞株の作製

    • 安定にトランスフェクトされたCHO細胞株をスクリーニングして高発現体を選択します。生産細胞株は、バイオ製造のための無タンパク質培地に適合されます。遺伝子操作されたCHO細胞は、非常に高い収量でCHO発現体の確立を可能にし、これは、フルサイズ組換えIgGの生産におけるコストを劇的に減少させます。一度で4.5g / Lの収率で細胞株を獲得します。


ご注文方法・参考価格等の詳細についてはこちら。



関連製品





[お問い合わせ]
メール: biologica [at] biologica.co.jp
電話: 052-262-6732
ホームページはこちらから↓
http://www.biologica.co.jp/
biologica_twitter https://www.facebook.com/BiologicaCo/ http://blogs.yahoo.co.jp/analytical_biologica
投稿者 時刻:
ラベル: , , , , , , , ,
場所: 日本, 〒460-0011 愛知県名古屋市中区大須４丁目１０−４０

2017年5月19日金曜日

Single-domain antibody 単一ドメイン抗体 - Nanobody

バイオロジカはシングルドメイン抗体 (ナノボディ) に関する製品・サービスを提供致します。
from Creative Biolabs


cf. 重鎖抗体、IgNAR

シングルドメイン抗体とは？


ドメイン抗体、VHH、VNAR、sdAbなどとしても知られるシングルドメイン抗体は、単一のモノマー可変抗体ドメインからなり、軽鎖及び従来のFab領域の重鎖のCHドメインを欠く、一種の抗体フラグメントです。第1のシングルドメイン抗体は、ラクダ科動物（例えば、ドロミダ、ラクダ、ラマおよびアルパカ）で同定される重鎖抗体のVHHドメインから作製されました。軟骨魚類（例えば、サメ）重鎖抗体（IgNAR）のVNARドメインは、sdAbの開発のためのもう1つの有力供給源です。別のアプローチとしては、いくつかの重要な残基をラクダ化することによって、ヒトまたはマウスの正常IgGからの二量体可変ドメインを単量体に分割することがあります。


従来型と重鎖抗体


SdAbsの特長

  • 特異性
  • サブナノモルの高親和性
  • 生産性
  • 小さなサイズ (~15 kDa)
  • 安定性
  • 溶解性

Table 1  Comparison of general properties of different forms of antibody fragments
Property FAb fragments ScFvs sdAbs **
Size ~50 kDa (FAbs) ~25 kDa ~12 kDa
Proven commodity +++ (several marketed) +/– (late phase Clinical trials) +/– (early phase clinical trials)
High affinity + +/– +/– (depends on technology used)
Manufacturing CHO, E. coli, yeasts E. coli, yeasts E. coli
Stability (e.g. pH, tempera xidation, shear stress) + +/– ++
Ease of purification +/– +/– +/–
Potential for ambient temperature storage formulation +/– – +
Alternative routes of administration (e.g. intranasal,inhalation) – +/– +
Potential for blocking enzyme active sites +/– +/– + (particularly nanobodies and IgNARs)
Tissue penetration ++ +++ ++++
Cavity binding – – ++
Manufacturable bi-, tri-, and multi-specificity – +/– ++
Effector functionality (e.g. ADCC, ADPC, CDC) – – –
Serum half-life (without half-life extension technology) < 1 h < 1 h < 1 h***
Ability to extend half-life +++ (up to ~10–12d with PEGylation)* +++ (up to ~10–12 d with PEGylation)* +++ (up to ~10–12d with PEGylation)*, ***
Potential for intracellular targeting – +/– + (especially if disulfide bonds are removed)
Ease of manipulation + +/– (some aggregation issues) +
Ability to dimerize or concatenate – + ++
**General principles covering both human domain antibodies, camelid sdAbs, and IgN antibodies.
***Ability to make albumin binding domains that can be fused to domain antibodies, yielding better half-life with only modest increase in size.



商品詳細は弊社ホームページをご覧ください。
シングルドメイン, scFv/Fab 抗体、ライブラリー





関連製品




[お問い合わせ]
メール: biologica [at] biologica.co.jp
電話: 052-262-6732
ホームページはこちらから↓
http://www.biologica.co.jp/
biologica_twitter https://www.facebook.com/BiologicaCo/ http://blogs.yahoo.co.jp/analytical_biologica
投稿者 時刻:
ラベル: , , , , , , , , , ,
場所: 日本、〒460-0011 愛知県名古屋市中区大須４丁目１０−４０
登録: 投稿 (Atom)