同社はさまざまな種類の発現システムにおいて高効率の抗体産生サービスを提供しております。
さまざまな用途・分野での抗体製造をサポートするため、抗体産生の包括的なサービスを提供することができます。配列最適化から、遺伝子合成 (安価な遺伝子合成はこちら) から抗体の発現および精製まで、研究スケールでも工業的製造でも対応可能です。同社の抗体生産サービスには、二重特異性抗体、組換えIgG、scFv (single-chain fragment variable) / Fab (fragment antigen-binding) およびシングル・ドメイン抗体(sdAb)の産生および精製も含まれます。
発現サービス概要
- 細菌における抗体の発現【大腸菌のペリプラズムにおける発現の分泌、大腸菌の細胞質における可溶性発現、および封入体としての不溶性発現】
- 哺乳類細胞における抗体の発現【CHO(Chinese Hamster Ovary)または293細胞を用いた一過性発現、安定したCHO細胞での持続的な発現、高発現体を選択するための細胞株(4.5g / Lの細胞株が得られている)における持続的な発現】
- 昆虫細胞における抗体の発現
- 酵母における抗体の発現
- カスタマイズされた精製プロセス
サービスの利点
- 高い発現レベル
- 短い作製時間
- 高純度
- 低毒性
- 広範なクローニングの経験
- 10gレベルまでの大規模
- GLP、cGMP標準
- ヒト化や親和性の成熟など、さらなる抗体工学
Recombinant IgG Production
Creative Biolabs社は、ファージディスプレイ抗体ライブラリースクリーニングまたはマウス/ラットハイブリドーマ細胞株由来の、遺伝子操作された小さなscFvまたはFabヒト/マウス抗体を、例えば、ADCC(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity抗体依存性細胞傷害)・非ADCCといった、様々な機能のFcフラグメントを有するフルサイズ組換えヒト(またはマウス)IgGに変換するサービスを提供します。哺乳類細胞における組換えIgGの大規模な生産基盤も確立しております。
注目すべきは、ヒトにおける組換えヒトIgG抗体(ヒトタンパク質を標的とした)の挙動を模倣するために、ファージディスプレイマウスscFv / Fabライブラリー(マウスタンパク質を標的とする)に由来する特異性がマッチした組換えマウスIgG抗体がしばしば産生され、動物モデルで使用されます。
ヒト化/組換えヒトIgGの安定した発現のために、改変FRT / Flp-Inリコンビナーゼ系を用いてCHO細胞にヒトIgGを産生します。組換えマウスIgGの安定した発現には同じアプローチが用いられます。転写活性のあるゲノム座に単一の安定して組み込まれたFRT部位を含むCHO細胞株をあらかじめ選択し、それらが組換えヒトIgG(種々の抗原を標的とする)の高レベル発現体を産生することができることを証明しました。ただし、これらの予め選択された細胞株から開始しても、組換えヒト(マウス)IgGを、例えば800mg / Lといった、費用対効果の高いレベルで発現することができる安定な細胞株を作製するためにはかなりの時間と労力が必要ではあります。産生の最後に、組換え抗体は3ステップ精製されます(プロテインA / G、続いて2つの精製ステップとして、抗体モノマー>99%、エンドトキシンレベル<0.5EU / mg抗体、プロテインA残留物<10PPM)。ヒト用の抗体に相当)。また、プロセス技術は開示されません。安定細胞株の提供もされません。ですが、将来の生産に備え、細胞株は無料で2年間保管されます。
キメラ抗体発現ベクターの構築
ファージディスプレイ技術から得られた、またはマウス/ラットハイブリドーマ細胞株から増幅されたscFvまたはFab抗体の遺伝子は、ヒトまたはマウスのIgG軽鎖および重鎖の定常領域を含む同社独自の哺乳類発現ベクターにクローニングされます。CHO細胞の一過性トランスフェクション
組換え抗体の発現を確認するために、CHOまたは293細胞を用いた一過性発現を行います。小規模の抗体産生には、一過性発現は安定発現と比較してより安価です。安定したCHO細胞株の作製
安定にトランスフェクトされたCHO細胞株をスクリーニングして高発現体を選択します。生産細胞株は、バイオ製造のための無タンパク質培地に適合されます。遺伝子操作されたCHO細胞は、非常に高い収量でCHO発現体の確立を可能にし、これは、フルサイズ組換えIgGの生産におけるコストを劇的に減少させます。一度で4.5g / Lの収率で細胞株を獲得します。
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